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你所不知道的細菌培養的常用試劑

點擊次數:375 發布時間:2020-07-31
  一、與顏色反應有關的試劑
  1、斐林試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液).用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合後的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色.
  2、班氏糖定性試劑:為藍色溶液.和葡萄糖混合後沸水浴會出現磚紅色沉澱.用於尿糖的測定.
  3、雙縮脲試劑:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液).用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻.如待測中存在蛋白質,則呈現紫色.
  4、蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹Ⅲ顆粒溶於95%的酒精中,搖勻.用於檢測脂肪.可將脂肪染成橘黃色(被蘇丹Ⅳ染成紅色).
  5、二苯胺:用於鑒定DNA.DNA遇二苯胺(沸水浴)會被染成藍色.
  6、甲基綠:用於鑒定DNA.DNA遇甲基綠(常溫)會被染成藍綠色.
  7、碘液:用於鑒定澱粉的存在.遇澱粉變藍.
  8、龍膽紫溶液:(濃度為0.01g/ml或0.02g/ml)用於染色體著色,可將染色體染成紫色,通常染色3~5分鍾.(也可以用醋酸洋紅染色,可將染色體染成紅色)
  9、伊紅—美藍試劑:大腸杆菌鑒定,與其中有機酸反應產生深紫色,有金屬光澤.
  10、結晶紫染液:用於自生固氮微生物的鑒定,染色,利於觀察.
  11、重鉻酸鉀:酸性條件下與酒精反應,由橙紅變為灰綠.
  12、溴麝香草酚藍:與二氧化碳反應由藍變綠,在變黃.
  13、健那綠:與線粒體反應,將線粒體染成藍綠色.
  14、甲基綠:與DNA反應,將DNA染成綠色.
  15、吡羅紅:與RNA反應,將RNA染成綠色.
  二、作為溶劑的試劑
  1、酒精在不同實驗中的作用
  (1)50%的酒精溶液:在脂肪鑒定中,用蘇丹Ⅲ染液染色,再用50%的酒精溶液洗去浮色.
  (2)75%的酒精溶液:用於殺菌消毒,75%的酒精能滲入細胞內,使蛋白質凝固變性.低於這個濃度,酒精的滲透脫水作用減弱,殺菌力不強;而高於這個濃度,則會使細菌表麵蛋白質迅速脫水,凝固成膜,妨礙酒精透入,削弱殺菌能力.75%的酒精溶液常用於手術前、打針、換藥、針灸前皮膚脫碘消毒以及機械消毒等.
  (3)95%的酒精溶液:冷卻的體積分數為95%的酒精可用於凝集DNA.用於DNA的粗提取實驗.
  (4)95%的酒精溶液和15%的鹽酸等體積混合可用於解離根尖.用於植物根尖分生區有絲分裂的實驗觀察,作為解離液可以將植物細胞分離開.
  2、丙酮(酒精):用於提取葉綠體中的色素.使色素在有機溶劑丙酮中溶解,便於溶解.
  3、層析液:(成分:20份石油醚、2份丙酮、和1份苯混合而成,也可用93號汽油)可用於色素的層析,即將色素在濾紙上分離開.
  4、0.1g/mL的檸檬酸鈉溶液:與雞血混合,防凝血.用於DNA的粗提取實驗.
  5、氯化鈉溶液:
  (1)可用於溶解DNA.當氯化鈉濃度為2mol/L、 0.015mol/L時DNA的溶解度較高,在氯化鈉濃度為0.14 mol/L時,DNA溶解度較高.
  (2)濃度為0.9%時可作為生理鹽水.
  (3)高濃度食鹽:選擇培養基,金黃色葡萄球菌可以生存.
  三、作為培養基的成分
  1、青黴素:選擇培養基,使黴菌,酵母菌可以生存,殺死細菌和放線菌.
  2、蛋白腖:微生物培養基中的C源、N源和生長因子,作為培養異養型微生物的原料.
  3、瓊脂:固體培養基成分;生長素生理功能(溫特實驗)
  四、育種中使用的試劑
  1、胰蛋白酶:可用來分解蛋白質,可用於動物細胞培養時分解組織使組織細胞分散.
  2、纖維素酶、果膠酶:可用於植物細胞培養時分解組織使組織細胞分散.
  3、秋水仙素:人工誘導多倍體試劑.用於萌發的種子或幼苗,可使染色體組加倍,原理是可抑製正在分裂的細胞紡錘體的形成.
  4、氯化鈣:增加細菌細胞壁的通透性(用於基因工程的轉化,使細胞處於感受態)
  5、細胞工程促溶劑:
  (1)PEG(聚乙二醇):動物細胞及植物細胞工程中,用於細胞的融合.
  (2)滅活(仙台)病毒:動物細胞工程中,用於細胞的融合.
  6、硫酸二乙酯:生物人工誘變劑,可以導致生物基因突變.
  7、亞硝酸(鹽):
  (1)化學致癌因子,導致細胞癌變.
  (2)生物人工誘變劑,可以導致生物基因突變.
  五、其他
  1、20%的肝髒、3%的過氧化氫、3.5%的氯化鐵:用於比較過氧化氫酶和Fe3+的催化效率.(新鮮的肝髒中含有過氧化氫酶)
  2、蔗糖
  (1)3%的蔗糖溶液、3%的可溶性澱粉溶液、2%的新鮮澱粉酶溶液:用於探索澱粉酶對澱粉和蔗糖的作用實驗.
  (2)植物組織培養的人工合成培養基的原料之一.
  (3)0.3g/mL的蔗糖溶液:相當於30%的蔗糖溶液,比植物細胞液的濃度大,可用於質壁分離實驗.
  3、色素提取:
  (1)二氧化矽:在色素的提取的分離實驗中研磨綠色葉片時加入,可使研磨充分.
  (2)碳酸鈣:研磨綠色葉片時加入,可中和有機酸,防止在研磨時葉綠體中的色素受破壞.
  4、過氧化氫溶液:
  (1)用來作為驗證酶的高效性實驗
  (2)一定濃度的該溶液可以作為消毒劑,有一定的腐蝕性.
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